人重组成釉蛋白C端肽在大肠杆菌中的表达及初步纯化

来源 :牙体牙髓牙周病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuye1580772
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目的:在大肠杆菌中表达人重组成釉蛋白C 端肽,并对重组蛋白进行纯化,为进一步制备抗人成釉蛋白抗体和功能研究奠定基础.方法:将编码人成釉蛋白C 端肽的基因片段克隆到大肠杆菌表达载体pRSET-A上,构建表达质粒pRSET-A-AMBN,以大肠杆菌E. coli BL21(DE3)为宿主菌进行诱导表达,表达产物经镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)柱进行亲和层析纯化.结果:工程菌在IPTG诱导3h后,在SDS-PAGE上出现一条新的蛋白带,相对分子量(Mr)为52×103,以可溶形式存在,经Ni-NTA
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