【摘 要】
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目的：探讨A激酶锚定蛋白9（AKAP9）对肺腺癌细胞A549的作用及其可能的分子机制。方法：通过实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）和蛋白质印迹（Western blot）法检测shRNA的沉默效果；通过MTT和克隆形成实验检测AKAP9对肺腺癌细胞A549增殖的影响；Transwell实验检测AKAP9对肺腺癌细胞A549迁移的影响；流式细胞术检测细胞周期；Western blot检测周期相关
【机 构】
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温州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科
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目的：探讨A激酶锚定蛋白9（AKAP9）对肺腺癌细胞A549的作用及其可能的分子机制。方法：通过实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）和蛋白质印迹（Western blot）法检测shRNA的沉默效果；通过MTT和克隆形成实验检测AKAP9对肺腺癌细胞A549增殖的影响；Transwell实验检测AKAP9对肺腺癌细胞A549迁移的影响；流式细胞术检测细胞周期；Western blot检测周期相关蛋白P27、细胞周期素D1（Cyclin D1）、细胞周期素依赖性激酶4（CDK4）的表达和细胞外信号调节激酶（ERK）通路中表皮生长因子受体（EGFR）、ERK的磷酸化水平。结果：RT-q PCR和Western blot结果显示，shRNA可以有效地沉默肺腺癌细胞A549中AKAP9的表达（P<0.01）。MTT和克隆形成结果示，与对照组相比，沉默AKAP9显著抑制癌细胞A549的增殖和克隆形成能力（P<0.01）。Transwell实验示，与对照组相比，沉默AKAP9显著抑制癌细胞A549的迁移能力（P<0.01）。流式细胞术结果示，与对照组相比，沉默AKAP9可以诱导肺腺癌细胞G1-S期阻滞（P<0.01）。Western blot结果示，与对照组相比，沉默AKAP9增加细胞周期负性调控因子P27，减少正性调控蛋白Cyclin D1、CDK4的表达，并降低EGFR、ERK的磷酸化水平（P<0.01）。结论：沉默AKAP9可以通过抑制ERK通路活性减弱肺腺癌细胞A549增殖和迁移的能力。
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