【摘 要】
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目的 预测旋毛虫成虫期Ad48 h-Ts3基因和旋毛虫四跨膜基因的抗原性,合成和表达这两个基因并评价其潜在诊断价值. 方法 对旋毛虫四跨膜基因和成虫期Ad48h-Ts3基因采用生物信息学分析其亲、疏水性,预测其可能的抗原表位,对其密码子优化后进行基因序列合成,并亚克隆至pET28a表达载体,在大肠埃希菌中表达获得重组蛋白,以小鼠感染血清进行Western blotting识别重组蛋白,评估其诊断价
【机 构】
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200025上海,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,WHO疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心,卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,200025上海,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,WHO
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目的 预测旋毛虫成虫期Ad48 h-Ts3基因和旋毛虫四跨膜基因的抗原性,合成和表达这两个基因并评价其潜在诊断价值. 方法 对旋毛虫四跨膜基因和成虫期Ad48h-Ts3基因采用生物信息学分析其亲、疏水性,预测其可能的抗原表位,对其密码子优化后进行基因序列合成,并亚克隆至pET28a表达载体,在大肠埃希菌中表达获得重组蛋白,以小鼠感染血清进行Western blotting识别重组蛋白,评估其诊断价值. 结果 生物信息学分析表明,旋毛虫四跨膜基因在其他物种中存在同源序列,具有两个跨膜区;而成虫期基因Ad48 h-Ts3具有丰富的抗原表位,为旋毛虫所特有;这两个基因经亚克隆至表达载体后,可观察到Ad48 h-Ts3基因有较明显的表达,且表达产物可被感染旋毛虫的小鼠血清识别,而四跨膜蛋白未见明显表达. 结论 旋毛虫成虫期蛋白Ad48 h-Ts3原核表达成功并可作为旋毛虫病诊断的潜在候选抗原。
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