建立人乳腺珠蛋白mRNA FQ-PCR方法用于乳腺癌微小转移的诊断

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目的 克隆人乳腺珠蛋白(human mammaglobin,hMaM)基因,建立荧光定量PCR方法,探讨外周血hMaM mRNA的表达作为乳腺癌血行微小转移标志物的可能性。方法 设计特异引物,用RT-PCR方法从乳腺癌组织扩增获得目的片段,利用T/A克隆将PCR产物插入pMD-18T载体;优化扩增条件,以pMD/M质粒制备标准曲线,建立FQ-PCR方法,对乳腺癌不同分期的患者(n=28),乳腺良性疾病患者(n=15),其他肿瘤患者(n=33)的外周血进行检测。结果 成功获得hMaM基因并完成克隆,阳性克隆
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