【摘 要】
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用PCR方法构建10个赖氨酸与纤溶酶原激活剂抑制物-1的融合基因Lys10-PAI-1,并克隆于pET28a(+)和pET32a(+)原核表达载体. 将重组表达质粒pET32-PAI和pET28-PAI转化大肠杆菌BL2
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用PCR方法构建10个赖氨酸与纤溶酶原激活剂抑制物-1的融合基因Lys10-PAI-1,并克隆于pET28a(+)和pET32a(+)原核表达载体. 将重组表达质粒pET32-PAI和pET28-PAI转化大肠杆菌BL21(DE3). IPTG诱导后可获得分子量分别为63 kD和43 kD的目的蛋白,表达蛋白占菌体蛋白20%以上,大多数重组蛋白以不溶形式存在. 表达产物经变性、复性、超滤、透析和亲和层析等步骤,可以得到纯化的Trx*PAI-1和rPAI-1重组蛋白. Western 印迹结果表明,目的蛋白
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