HEPC1和HEPC2真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：eric_vl

【摘要】

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目的构建小鼠HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体,并观察其分别稳定转染NIH3T3细胞后的表达情况.方法从小鼠肝组织中分离总RNA,采用RT-PCR获得小鼠HEPC1和HEPC2基因全长cDNA,分

【作者】

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王元忠周建新钟小林廖荣霞

【机构】

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第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

【出处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2005年9期

【关键词】

：

HEPCIDIN PCDNA3 NIH3T3细胞转染小鼠 hepcidin pcDNA3 NIH3T3 cell line transfection

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目的构建小鼠HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体,并观察其分别稳定转染NIH3T3细胞后的表达情况.方法从小鼠肝组织中分离总RNA,采用RT-PCR获得小鼠HEPC1和HEPC2基因全长cDNA,分别将其克隆至真核表达载体pcDNA3上,酶切和测序鉴定后,用脂质体将重组子分别转染至NIH3T3细胞中,G418进行长期筛选,然后用RT-PCR和dot-ELISA检测HEPC1和HEPC2的表达.结果RT-PCR获得预期大小的片段,重组子pcDNA3-HEPC1和pcDNA3-HEPC2酶切正确,测序表明

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