禽致病性大肠杆菌clpV基因缺失株的构建及其对Ⅰ型菌毛主要基因表达的影响

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wu21211721
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为研究禽致病性大肠杆菌(APEC)六型分泌系统(typeⅥsecretion system,T6SS)clpV基因对Ⅰ型菌毛表达的影响,本研究利用Red同源重组系统构建了禽致病性大肠杆菌clpV基因缺失株TW-XM△clpV。将clpV基因克隆到表达载体pBR322中,构建相应回补株TW-XMC△clpV。通过PCR特异性检测和基因测序,验证上述突变株均构建成功,且能稳定遗传。利用荧光定量PCR检测野生株、clpV缺失株和回补株中Ⅰ型菌毛9个主要基因的mRNA相对表达量。结果显示:与野生株相比,缺失株中f
其他文献
无乳链球菌是奶牛乳腺炎最主要的致病菌之一,严重影响奶牛养殖业的发展。本研究旨在揭示血根碱对无乳链球菌(Streptococcus agalactiate)的抗菌机理,为中草药单体抑菌产品的开发提供理论依据。通过最小抑菌浓度和抑菌曲线分析了血根碱对无乳链球菌的抑菌活性,并检测无乳链球菌胞外D260和D280及荧光染料PI摄取能力,胞外乳酸脱氢酶(LDH)活性,评价细胞膜完整性、通透性;通过扫描电镜和透射电镜观察血根碱对无乳链球菌细胞形态和超微结构的影响,从而探究血
为建立犬弓形虫抗体间接ELISA(iELISA)诊断方法,本研究对弓形虫TgCyP基因进行重组表达,纯化获取重组蛋白并进行Western blot检测,方阵滴定法确定纯化好的重组蛋白抗原最佳包被质量浓度和血清稀释度,优化包被条件、酶标二抗稀释度、封闭液和封闭时间等,建立犬弓形虫抗体iELISA诊断方法,并对建立的iELISA检测方法进行重复性、敏感性、特异性试验和临床检测。结果显示,抗原最佳包被质量浓度为1mg/L,最佳包被条件为4℃包被过夜,最佳封闭条件为5%脱脂奶粉37℃作用2h。待检血清以1∶200
为探究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的V蛋白拮抗宿主干扰素(interferon,IFN)信号通路对先天性免疫的影响,本试验测定了低毒力LaSota株插入BC株V蛋白的重组病毒rL-BC的毒力和感染后4,8,12h的感染效率,病毒感染后上清的IFN-β生成情况和P-STAT1、MDA5蛋白的表达水平,并检测感染后DF1、A549细胞先天性免疫分子的转录水平。结果显示,重组病毒的颅内致病指数(intracerebral pathogenicity index,ICPI)
为了建立永生化的犬骨髓间充质干细胞(cBMSCs)株,为其在基础研究方面的应用创造方便快捷的途径,本试验将构建好的pLOX-Ttag-iresTK慢病毒载体包装后感染cBMSCs,连续培养传至5
牛奶中血清淀粉样蛋白A(MAA)是表征奶牛乳腺炎的重要生物标志物,本研究构建了携带MAA基因的重组原核表达质粒pET28a-SUMO-MAA,采用大肠杆菌BL21(DE3)作为表达菌株,IPTG诱导表
近年来,慢病毒载体系统(lentivirus vector system)研究发展迅速,作为基因改造的有效手段在生命科学领域中得到广泛运用。该系统携带基因片段大,整合效率高,能够感染多种分裂期与非分裂期的细胞,实现基因在宿主体内的长期稳定表达。现就慢病毒载体系统的基本结构、发展历程以及临床应用等方面的研究情况进行综述,介绍该系统目前的发展和应用现状。
为了解牡荆提取物的主要化学成分及其体外抗氧化能力,运用超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry,UPLC-MS)技术对牡荆醇提物和水提物进行分析,并对2种提取物进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力评价。一级质谱数据显示在醇提物和水提物中共检测出77种化合物的信息,其中水提物和醇提物共有的化合物有44种,醇提物独
为研究日粮中不同水平的高羊毛氨酸硒(SeHLan)对幼龄比格犬抗氧化指标和机体免疫应答的影响,本试验选用25只3月龄比格犬,随机分为空白组、疫苗组和3个SeHLan添加组,SeHLan添加组在接种狂犬病疫苗的同时,分别在基础日粮中添加不同剂量的SeHLan(0.35,1.00,2.00mg/kg),并分别在接种狂犬病疫苗后0,3,7,14,21,28,35d采集血清,测定犬血清硒含量、GSH-Px和SOD活力、MDA含量以及狂犬病抗体IgG滴度。结果显示:SeHLan添加组的GSH-Px、SOD活性显著高
5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是一种神经递质,广泛分布于哺乳动物的雌性生殖组织中,在细胞增殖、分化、卵母细胞成熟和胚胎发育等过程中起着至关重要的作用,但5-HT对猪胚胎发育的影响尚不清楚。本试验以猪孤雌激活胚胎为研究对象,利用荧光定量PCR、免疫荧光染色等技术,探讨5-HT对胚胎发育的影响。结果表明,5-HT处理可显著抑制猪孤雌胚胎的卵裂率及囊胚率,增加囊胚细胞凋亡数量,促进促凋亡基因BAX的表达,并影响H3K4me2及H3K4me3的表达。此外,5-HT处理可导致猪孤雌胚
为探讨单核增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)侵入山羊(Capra hircus)中枢神经系统的组织定位及其对脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表