人结核杆菌热休克蛋白65重组卡介苗疫苗的构建、表达及鉴定

来源 :华中科技大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：hyb332145820

【摘要】

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目的构建人结核杆菌热休克蛋白65(HSP65)重组卡介苗(BCG)疫苗.方法用PCR技术从BCG基因组中扩增出抗原85B(Ag85B)的信号肽DNA序列,从pCMV-MTHSP 65质粒中扩增出HSP65全长基因.

【作者】

：

高红戴五星黄海浪陈智浩梁靓程继忠皇甫永穆

【机构】

：

华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系

【出处】

：

华中科技大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2004年3期

【关键词】

：

HSP65 BCG 结核杆菌热休克蛋白高效表达重组卡介苗质粒信号肽重组体基因 signal peptide human Mycobacterium

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目的构建人结核杆菌热休克蛋白65(HSP65)重组卡介苗(BCG)疫苗.方法用PCR技术从BCG基因组中扩增出抗原85B(Ag85B)的信号肽DNA序列,从pCMV-MTHSP 65质粒中扩增出HSP65全长基因.利用DNA重组技术将以上两个片段插入质粒pBCG-2100的人结核杆菌HSP70启动子下游,构建一个分泌型的原核穿梭表达质粒pBCG-SP-HSP65.利用电穿孔的方法将该质粒转入BCG中,经热诱导后,用SDS-PAG电泳来观察其表达水平.利用Western blot来检验HSP65的生物学活性

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