【摘 要】
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目的 探讨Zeste同源物2增强子（enhancer of zeste homologue 2,EZH2）对小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响,并初步阐述EZH2作为长链非编码RNA HOTTIP的下游效应分子的调控通路。方法 采用RNA干扰技术和EZH2小分子抑制剂GSK-126处理SCLC细胞,并使用qRT-PCR、Wester
【基金项目】
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广东省基础与应用基础研究基金（2021B15151400 67）； Disciplinary Construction of Posts for Zhujiang Scholars（4SG21005G）； 大学生创新创业训练计划（202210571036）；
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目的 探讨Zeste同源物2增强子（enhancer of zeste homologue 2,EZH2）对小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响,并初步阐述EZH2作为长链非编码RNA HOTTIP的下游效应分子的调控通路。方法 采用RNA干扰技术和EZH2小分子抑制剂GSK-126处理SCLC细胞,并使用qRT-PCR、Western blot、CCK-8实验、流式细胞术及免疫组化法分析EZH2参与SCLC恶性表型的调控作用。结果 与癌旁肺组织相比,EZH2在SCLC组织中的表达显著升高（P＜0.05）;与人支气管上皮细胞相比,EZH2在SCLC细胞株中的表达较高;与SCLC化疗敏感细胞相比,EZH2在SCLC化疗耐药株中的表达更高（P ＜0.05）。采用EZH2小分子抑制剂GSK-126和EZH2 shRNA干扰序列抑制或沉默EZH2表达后,CCK-8实验分析发现,沉默EZH2表达后,SCLC细胞对三种化疗药物的敏感性增强（P ＜0.001）、增殖能力下降（P ＜0.01）。流式细胞术分析发现,EZH2下调后两株细胞G2期细胞比例减少（P ＜0.05）、细胞早凋率（P ＜0.01）及晚凋率（P ＜0.05）均呈增加趋势。生物信息学技术分析发现,EZH2启动子区甲基化水平在肺鳞状细胞癌及肺腺癌组织中均较低（P ＜0.05）,采用GSK-126处理细胞,发现细胞中EZH2蛋白表达随GSK-126升高而下降（P＜0.05）,细胞中甲基转移酶H3K27me3的表达量亦同时呈梯度下降趋势（P＜0.05）。HOTTIP下调的细胞和裸鼠瘤体组织中EZH2和H3K27me3蛋白的表达呈下降趋势（P＜0.05）。结论 EZH2是长链非编码RNA HOTTIP的效应分子之一,其可能在SC LC恶性进展中发挥重要作用。
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