人转化生长因子β1在大肠杆菌RR1中的表达及产物纯化

来源 :暨南大学学报：自然科学与医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tecra1234

【摘要】

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目的:构建能高效表达人转化生长因子β1的基因工程菌,优化产物分离纯化的条件方法:用PCR方法扩增人转化生长因子β1的cDNA,将该cDNA片段插入经改造的pBV 220表达载体pBL 2的

【作者】

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李校堃吴晓萍郑青黄亚东许华姚成灿

【机构】

：

暨南大学医药生物技术研究开发中心

【出处】

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暨南大学学报：自然科学与医学版

【发表日期】

：

2001年5期

【关键词】

：

人转化生长因子β1 分离纯化基因克隆基因表达重组蛋白生物活性大肠杆菌 TGF-β1cloning and expressionpurification

【基金项目】

：

国家重点基础研究发展计划(973计划)

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目的:构建能高效表达人转化生长因子β1的基因工程菌,优化产物分离纯化的条件方法:用PCR方法扩增人转化生长因子β1的cDNA,将该cDNA片段插入经改造的pBV 220表达载体pBL 2的表达框架中,构建了表达菌株RR1/pBL2-TGF-β1.42℃温控诱导表达.采用谷胱甘肽法,对重组蛋白进行复性.通过阳离子交换、变性分子筛层析纯化重组蛋白.用MTT法测定重组蛋白的活性.结果:所构建的表达菌株,其TGF-β1的表达量约为15%.重组蛋白的复性率达到30%.经纯化获得了银染一条带的重组蛋白.测活表明重组蛋

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