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目的 :探讨5-氮杂胞苷、顺铂联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的作用及可能的分子机制。方法:用5-氮杂胞苷单药、TRAIL单药、5-氮杂胞苷+TRAIL以及5-氮杂胞苷+顺铂+TRAIL联合用药分别作用A549细胞后,采用MTT法和FCM法分别检测细胞增殖抑制率和细胞凋亡率。采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测5-氮杂胞苷处理前后A549细胞中死亡受体(4death receptor 4,DR4)m RNA及蛋白表达量的变化。甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)法检测5-氮杂胞苷处理前后A549细胞中DR4基因的启动子甲基化状态。结果 :5-氮杂胞苷+TRAIL组A549细胞的增殖抑制率及凋亡率均明显高于TRAIL单药组(P值均<0.05),而5-氮杂胞苷+顺铂+TRAIL组A549细胞的增殖抑制率及凋亡率均明显高于5-氮杂胞苷+TRAIL组(P值均<0.05)。A549细胞在经5-氮杂胞苷处理前,其DR4基因启动子呈甲基化状态,DR4 m RNA及蛋白表达水平均较低;经5-氮杂胞苷处理后,DR4基因启动子呈非甲基化状态,DR4表达水平明显提高,并呈时间依赖性(P值均<0.05)。结论 :5-氮杂胞苷可以逆转DR4基因启动子的甲基化状态,使其表达上调,增强TRAIL诱导A549细胞凋亡的作用,逆转细胞对TRAIL的耐药性。同时,亚毒性剂量的顺铂可进一步增强TRAIL对A549细胞的凋亡诱导作用。提示5-氮杂胞苷、顺铂联合TRAIL可能成为治疗肺癌的一种新策略。