观察耐替莫唑胺人脑胶质瘤U251细胞(U251 /TR)经放射线照射后多药耐药基因(MDR1)及P-糖蛋白(P-gp)表达的改变。
方法体外常规培养U251细胞，低浓度替莫唑胺分步诱导法诱导建立耐药细胞U251/TR。细胞活性检测试剂盒(CCK-8)检测替莫唑胺、阿霉素、依托泊苷、硫酸长春新碱和环磷酰胺对U251、U251/TR细胞的相对抑制率和耐药指数(RI)。采用双光子医用直线加速器产生的不同剂量(2、4、6、8、10、12、15 Gy)X线照射U251、U251/TR细胞24 h后，RTPCR检测细胞MDR1的表达，Western blotting检测细胞膜P-gp的表达。
结果CCK-8检测结果显示替莫唑胺、阿霉素、环磷酰胺、依托泊苷、硫酸长春新碱对U251细胞的抑制率分别为(19.3± 0.04)%、(39.9±0.13)%、(28.1±0.09)%、(66.2±0.02)%、(26.3±0.11)%，对U251 /TR细胞的抑制率分别为(3.2±0.03)%、(15.3±0.09)%、(4.1±0.03)%、(45.6±0.10)%、(10.8±0.04)% ，U251 /TR细胞对上述5种药物的RI分别为U251细胞的2.63、2.76、2.15、10.58、3.54倍；RT-PCR检测显示：2 Gy、4 Gy、6 Gy放射线照射U251/TR和U251细胞后，2种细胞的MDR1基因表达均依次下降，且6 Gy时降至最低。但经大剂量如8 Gy、10 Gy、12 Gy、15 Gy X线照射后，2种细胞的MDR1基因表达开始依次上升，均高于6 Gy照射组。Western blotting结果显示：6 Gy放射线照射U251 /TR和U251细胞后，P-gp的蛋白表达均下降。
结论小剂量的X线(8 Gy以下)照射后U251、U251/TR细胞的放射敏感性均增高，但大剂量的X线(8 Gy以上)照射后U251/TR、U251细胞均产生放射抗拒。