靶向绵羊MSTN基因的锌指核酸酶腺病毒表达载体的构建及活性验证

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：congsun

【摘要】

：

旨在构建并包装打靶绵羊MSTN基因的位点特异性锌指核酸酶腺病毒表达载体，以借助腺病毒的高转染效率和非整合性以及锌指核酸酶的高效性和特异性实现对绵羊MSTN基因的敲除。本研

【作者】

：

张存芳王令任刚张婷婷王瑞严国勇张智英

【机构】

：

西北农林科技大学动物科技学院

【出处】

：

畜牧兽医学报

【发表日期】

：

2012年8期

【关键词】

：

锌指核酸酶 MSTN基因腺病毒基因敲除 zinc-finger nuclease MSTN gene adenovirus targeted gene

【基金项目】

：

转基因生物新品种培育重大专项（2008ZX08008-003-01）

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旨在构建并包装打靶绵羊MSTN基因的位点特异性锌指核酸酶腺病毒表达载体，以借助腺病毒的高转染效率和非整合性以及锌指核酸酶的高效性和特异性实现对绵羊MSTN基因的敲除。本研究利用PCR扩增T2A序列和锌指核酸酶异源二聚体序列，测序鉴定后依次克隆至pAdTrack-CMV，得到pAdTrack-ZFNL-T2A-ZFNR穿梭载体，将之与腺病毒骨架载体pAdEasy-1共转染至BJ5183菌株进行同源重组，以构建pAdEasy-ZFNL-T2A-ZFNR表达载体。然后用上述表达载体转染HEK293细胞进行重组腺

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