【摘 要】
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在成功构建新城疫病毒（NDV）-F基因真核表达载体pCDNA3-NDV-F的基础上,应用脂质体LipofectamineTM2000介导法,将其转染小鼠肥大细胞瘤细胞株（P815）,经过加入G418（600μg/mL）,筛选得
【机 构】
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安徽农业大学安徽省人兽共患病学重点实验室,安徽安丰堂动物药业有限公司
【基金项目】
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国家自然基金项目（No.30671537）资助.
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在成功构建新城疫病毒（NDV）-F基因真核表达载体pCDNA3-NDV-F的基础上,应用脂质体LipofectamineTM2000介导法,将其转染小鼠肥大细胞瘤细胞株（P815）,经过加入G418（600μg/mL）,筛选得到稳定的细胞克隆株,并进一步扩大培养。应用Trizol法提取细胞RNA,经RT-PCR鉴定,转染细胞提取物在1600bp处出现目的条带。收集转染细胞,经Western blot和免疫荧光法检测到表达的目的蛋白。将获得的细胞株在液氮中冻存6个月后检测,该细胞株仍能很好表达NDV-F基因
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