【摘 要】
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目的：探讨microRNA-218抑制胶质瘤侵袭、迁移、增殖和抑制肿瘤干细胞样细胞自我更新的分子机制。方法：在胶质瘤细胞中过表达miR-218，利用定量逆转录PCR（qRT-PCR）和免疫印迹法（Weste
【机 构】
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第四军医大学唐都医院实验外科,陕西西安,710038西安医学院基础医学院,陕西西安,710021;第四军医大学唐都医院脑外科,陕西西安,710038;上海交通大学 微纳科学技术研究院,上海,20024
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目的：探讨microRNA-218抑制胶质瘤侵袭、迁移、增殖和抑制肿瘤干细胞样细胞自我更新的分子机制。方法：在胶质瘤细胞中过表达miR-218，利用定量逆转录PCR（qRT-PCR）和免疫印迹法（Western blotting）检测Bmi1的表达水平，并利用创伤修复和体外迁移实验检测胶质瘤细胞的迁移和增殖能力；通过裸鼠移植瘤实验，检测体内过表达miR-218对胶质瘤生长的影响；利用生物信息学手段预测miR-218的直接靶标，并通过qRT-PCR、蛋白质印记技术、荧光素酶报告系统和免疫荧光实验对预测的靶标基因进行验证；以胶质瘤细胞球形成实验和极限稀释法验证miR-218对胶质瘤干细胞样细胞自我更新能力的影响；构建Bmi 1干扰载体下调胶质瘤细胞中Bmi 1的表达，检测对胶质瘤迁移和增殖的影响；利用基因表达芯片分析胶质瘤细胞中miR-218对基因表达的影响。结果：Bmi1是miR-218的一个直接靶标，miR-218通过下调Bmi1的表达来削弱胶质瘤细胞的迁移和增殖能力，并抑制胶质瘤干细胞样细胞的自我更新。另外，miR-218还参与调控一系列与胶质瘤细胞发育相关的基因。结论：作为一种肿瘤抑制因子，miR-218能阻止胶质瘤细胞的迁移、侵袭、增殖，并削弱其干细胞样特征。
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