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目的：建立可同时检测痰标本中肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae,Sp）与b型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b,Hib）的多重降落PCR。方法：以Sp cpsA基因、Hib capⅡ区为靶标设计引物,并用PrimerBLAST在线软件检测其特异性,多重降落PCR检测492份痰标本,并以标准菌株作为对照,结果与细菌培养法进行比较。结果：所建立的多重降落PCR对Sp、Hib的检测下限分别达6.3 pg、0.2 pg;与细菌培养法相比,灵敏度及总灵