玉米转基因成分的非同源模板竞争定量PCR检测

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【摘要】

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建立了玉米转基因成分中35S启动子非同源模板的竞争定量PCR检测系统.竞争定量PCR的关键问题是内标物的制备.实验中非同源模板的构建是采用PCR方法对大肠杆菌基因组进行低严紧

【作者】

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栾春光马林郝彦玲朱本忠罗云波

【机构】

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中国农业大学

【出处】

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郑州工程学院学报

【发表日期】

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2004年1期

【关键词】

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转基因成分非同源模板竞争定量PCR检测系统转基因玉米 competitive quantitative PCR heterologous template

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建立了玉米转基因成分中35S启动子非同源模板的竞争定量PCR检测系统.竞争定量PCR的关键问题是内标物的制备.实验中非同源模板的构建是采用PCR方法对大肠杆菌基因组进行低严紧型扩增,回收预期DNA片段并将其构建到T-easy载体上.通过调整非同源模板浓度使竞争物PCR产物亮度与1%GMO玉米的亮度相同,从而确定转基因玉米的检出限为1%.然后以确定的内标物浓度与不同含量的GMO玉米样品进行竞争定量PCR反应,以此进一步确定样品中GMO的含量范围.

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