核转录因子红细胞系相关因子-2干扰质粒构建及鉴定

来源 :临床神经病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:SCY512355337
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目的 设计及构建小鼠核转录因子红细胞系相关因子-2(Nrf2)基因的干扰质粒,并筛选出效果最好的干扰质粒。方法 设计3组针对Nrf2基因的核糖核酸干扰(RNAi)序列,应用基因重组技术克隆入载体中构建短发夹RNA(shRNA),分别为shRNA1、shRNA2及shRNA3,通过基因测序鉴定,经Lipofectamine2000转染至BV2细胞,实时PCR检测Nrf2 mRNA的表达,Western Blot法检测Nrf2蛋白的表达。结果 测序表明,克隆入载体中的Nrf2干扰序列及读码框完全正确,实时PC
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