毛细管电泳法分离血清中乳酸脱氢酶同工酶

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目的利用还原型辅酶I(NADH)在340nm波长处特异性吸收峰,建立用毛细管区带电泳在线检测人血清中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的方法。方法实验中采用未涂层毛细管,长60cm,内径75μm,pH9.4(23℃)二氨基二甲基1,3丙二醇(AM2P)缓冲液含20mmol/L氧化型辅酶I(NAD+)、51.6mmol/L乳酸锂。结果在25min内完成电泳分离,乳酸脱氢酶同工酶1(LDH1)、乳酸脱氢酶同工酶5(LDH5)纯品各自均可得到较好峰形,而且LDH1、LDH5纯品的混合物亦可得到完全分离,在分析正常人血清与肝癌患者血清时,其结果与美国Helena公司REP全自动琼脂糖电泳结果一致,取得满意效果。结论该法快速、低耗,具有较好的推广应用价值。
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