【摘 要】
：
目的:探究CerS2基因在膀胱癌细胞中的作用及其可能的机制.方法:构建pEGFP-C1-CerS2重组表达载体,并转染膀胱癌细胞系T24,使用蛋白质免疫印迹实验检测GFP-CerS2的表达;运用CCK-8法检测细胞增殖活性;运用Annexin V荧光标记实验检测细胞凋亡水平;分别使用细胞划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移能力和侵袭能力;使用蛋白质免疫印迹实验检测细胞中AKT、p-AKT、mTOR及p-mTOR的表达水平.结果:重组GFP-CerS2融合蛋白在T24细胞中可以正常表达,过表达GFP
【机 构】
：
北京市第六医院泌尿外科,北京 100007;首都医科大学宣武医院普通外科,北京 100053
论文部分内容阅读
目的:探究CerS2基因在膀胱癌细胞中的作用及其可能的机制.方法:构建pEGFP-C1-CerS2重组表达载体,并转染膀胱癌细胞系T24,使用蛋白质免疫印迹实验检测GFP-CerS2的表达;运用CCK-8法检测细胞增殖活性;运用Annexin V荧光标记实验检测细胞凋亡水平;分别使用细胞划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移能力和侵袭能力;使用蛋白质免疫印迹实验检测细胞中AKT、p-AKT、mTOR及p-mTOR的表达水平.结果:重组GFP-CerS2融合蛋白在T24细胞中可以正常表达,过表达GFP-CerS2显著抑制了膀胱癌细胞的增殖活性,且显著增加了细胞凋亡水平.过表达GFP-CerS2抑制了膀胱癌细胞的迁移和侵袭能力.此外,过表达GFP-CerS2也显著抑制了膀胱癌细胞中AKT和mTOR的磷酸化修饰,但不影响总AKT及mTOR的表达水平.结论:过表达CerS2可以抑制AKT/mTOR信号通路,影响膀胱癌细胞的增殖和凋亡,并抑制细胞的迁移和侵袭能力.
其他文献
目的:探讨脂联素(APN)对子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用及分子机制.方法:分别采用磺酰罗丹明B(SRB)实验、细胞迁移(Transwell)实验和划痕实验检测子宫内膜癌细胞HEC-1B的增殖、迁移和侵袭能力.采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路相关蛋白、AdipoR1、AdipoR2、cyclinD1和cyclinE2蛋白表达水平.结果:与对照组相比,APN组HEC-1B细胞增殖、迁移及侵袭功能明显下降(P＜0.05).与对照组相
目的:探讨维生素E对妊娠中期高糖环境大鼠皮下脂肪组织中asprosin的表达影响.方法:将妊娠中期高糖环境大鼠(n=21)随机平分为三组-模型组、吡格列酮与维生素E组.格列酮与维生素E组分别灌胃80 mg/kg的吡格列酮和5mg/kg的维生素E,模型组灌胃等剂量的0.9％NaC1,1次/d,检测皮下脂肪组织中asprosin表达情况.结果:吡格列酮组与维生素E组给药第3d、第7d的血糖、体重低于模型组(P＜0.05),维生素E组低于吡格列酮组(P＜0.05).吡格列酮组与维生素E组给药第7d的皮肤组织超氧
In the Internet of Things (IoT),security and privacy issues of physical objects are crucial to the related applica-tions.In order to clarify the complicated security and privacy issues,the life cycle of a physical object is divided into three stages of pr
防火门作为公共消防安全的基础性“保护伞”,能够针对性阻隔、减缓火患的大规模发展、蔓延,为大众安全疏散、逃离火灾事故现场提供条件,是确保大众人身、财产安全及降低事故负面影响的有效法宝.然而,纵观我国各地防火门日常应用情况,不难发现由于各主体人员淡化、忽视了防火门对火患灾情的积极意义,导致对其关注程度不高,造成防火门在火灾事故中不能发挥消防作用、功效,为大众公共消防安全埋下了隐患.对此,文章简要分析了消防监督检查中防火门的常见性问题及其产生归因,着重阐述了可行性应对措施,旨在为消防领域工作人员提供管理参阅、借
随着我国材料技术的不断发展,各类新型防火材料开始走入到人们的生活之中,就目前来看,新型防火材料已经广泛地应用于当前的高层消防系统之中,各类新材料的应用使得高层消防系统的安全性、可靠性得到了显著地增强,同时也有效地节省了相关的能源,具有良好的经济性特点,得到了广泛好评.文章立足于实际,结合当前高层消防系统中防火材料的使用情况,对我国新型防火材料的应用进行了探讨与分析.
目的:研究千金藤素腹腔注射对卵巢癌模型大鼠的作用及其机制.方法:选取30只SD级清洁级健康雌性大鼠,按照随机数字表法分成模型组、实验组与空白对照组,每组各10只.空白对照组不予以处理,模型组与实验组建立卵巢癌模型,且实验组在造模后予以千金藤素腹腔注射干预,使用剂量为20 mg/kg每次,1次/d,给药30d,模型组与空白对照组予以等量生理盐水干预.比较各组大鼠荷瘤重量、腹水量以及肿瘤体积,癌胚抗原(CEA)、糖类抗原153(CA153)及人附睾蛋白(HE4)表达水平,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、雷帕霉
目的:探究间充质干细胞外泌体对脑内小胶质细胞极化和炎症因子释放的影响及其机制.方法:收集体外培养的间充质干细胞上清,超高速冷冻离心获取外泌体.采用纳米颗粒系统和透射电子显微镜分别检测外泌体粒径大小、形态结构和功能完整性.通过免疫荧光、ELISA和细胞流式等方式检测LPS刺激下,外泌体对BV2细胞的表型极化和炎症因子释放的影响.采用Western Blot法检测间充质干细胞外泌体对BV2细胞JAK1/STAT3通路活化的影响.结果:(1)间充质干细胞分泌的外泌体粒径大小主要介于40-100 nm,透射电镜显
目的:探究丝氨酸生物合成途径(SSP)关键酶磷酸丝氨酸氨基转移酶1(PSAT1)与肺腺癌细胞粘附的关系,并初步探讨其作用机制.方法:使用siRNA抑制PSAT1蛋白表达,观察肺腺癌细胞形态以及粘附变化,同时过表达PSAT1,反向观察PSAT1对肺腺癌细胞粘附的影响.初步探究其作用机制,采用免疫共沉淀-蛋白质谱法寻找与PSAT1直接相互作用的蛋白,筛选差异蛋白,并在过表达细胞体系中验证.结合临床公共数据库分析互作蛋白与患者预后关系.结果:发现敲低PSAT1引起肺腺癌细胞形态改变;敲低PSAT1抑制肺腺癌PC
目的:探讨肌肉减少症指数(SI)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者急性加重的预测价值.方法:选择2020年6月—2020年12月就诊的COPD患者65例(COPD组)及年龄、性别配对的对照组20例.比较两组患者的一般资料、慢性阻塞性肺病评估测试(CAT)评分、改良呼吸困难指数(mMRC)、肺功能、血清肌酐(Cr)及血清胱抑素C(Cy-sC)水平,通过Cr/CysC计算肌肉减少症指数(SI)水平.结果:COPD组患者用力肺活量占预计值百分比(FVC％)、第1秒用力呼气容积绝对值(FEV1)、第1秒用力呼气容
目的:探讨香草醛对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBI)的神经保护作用及机制.方法:参考Rice-Vannucci方法建立HIBI大鼠模型.HIBI大鼠建模后立即腹腔注射20 mg/kg(HIBI+20Van组)或40 mg/kg(HIBI+40Van组)的香草醛,每隔12h给药,连续7d.然后评估大鼠的神经行为及脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的水平.对BV2小胶质细胞进行氧糖剥夺/复氧(OGD/R)处理,并用20 μM香草醛培养.通过Western blot及免疫荧光检测HMGB1、NF-κB