Studies of Improving the Frequency of Indica Rice Transformation by Biolistic Bombardment

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In order to improve the frequency of indica rice transformation by biolistic bombardment, suitable culture conditions for embryonic calli,an optimal selection scheme for resistant calli and seedlings, and optimum bombardment parameters a investigated by using 14 commercially important indica rice cultivars. The main results show that the CC medium with 36g/L mannitol is a scheme subculture medium in which the browning of indica rice calli can be mitigated significantly; The concentration of 30~40mg/L Hyg or 150~200mg/L G418 or 10~20 mg/L Basta is suitable for selection of resistant calli; The transformation parameters of 100μg gold powder absorbing 0.2μg DNA per shot and 900 psi helium pressure and 6 cm bombardment distance and bombarded twice for each plate give the best result; Keeping the target calli on osmotic medium containing 60g/L mannitol from 12 ~24h before bombardment to 24~48h after it can increase the efficiencies of transformation . Furthermore, some transgenic indica rice plants are obtained using this optimized transformation system.
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