【摘 要】
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自噬在细胞复制性衰老中起着重要的作用.然而,早老细胞中的自噬现象基本无相关的报道.本文通过外源性过氧化氢（H2O2）的诱导,构建人胚肺二倍体成纤维细胞（2BS细胞）早老模型.首先,
【机 构】
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北京大学医学部生物化学与分子生物学系
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自噬在细胞复制性衰老中起着重要的作用.然而,早老细胞中的自噬现象基本无相关的报道.本文通过外源性过氧化氢（H2O2）的诱导,构建人胚肺二倍体成纤维细胞（2BS细胞）早老模型.首先,通过SA-β-gal染色,验证细胞早老;从形态学和特异标志分子及雷帕霉素作用的靶位点（mTOR）信号通路不同角度检测自噬的变化,其中形态学检测包括丹（磺）酰戊二胺（MDC）自噬分子定量法及电镜自噬超微结构的观察;特异标志分子LC3的检测包括GFP-LC3自噬定位法和免疫印迹法检测LC3;及检测mTOR信号通路下游激酶p70S6蛋
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