制备并用绿色荧光标志骨髓间充质干细胞(BM-MSC),观察其对博来霉素所致大鼠肺纤维化损伤的影响。
方法60只雄性SD大鼠随机分为5组,A组于气管内注入生理盐水,B、C、D、E组于气管内注入5 mg/kg博来霉素0.1 ml。建模后1 d,A、B组经尾静脉注射生理盐水1.0 ml,C组经尾静脉注射1.0 ml BM-MSC(1.0×106细胞),D组尾静脉注射1.0 ml BM-MSC(5.0×105细胞),建模后8 d,再给1.0 ml BM-MSC(5.0×105细胞)。E组尾静脉注射1.0 ml BM-MSC(1.0×107细胞)。建模后28、42 d处死各组一半大鼠,留取肺组织。行病理学检查,对HE染色切片评定肺组织肺泡炎程度,对Masson染色切片评定肺组织纤维化程度;测定肺组织的转化生长因子-β1(TGF-β1)、羟脯氨酸(HYP)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达水平,分析TGF-β1、HYP、MMP-2/TIMP-1与肺泡炎程度及肺纤维化程度评分的相关性。
结果A组肺泡结构正常,无明显的炎症或纤维化改变,B组博来霉素可致肺泡结构严重紊乱,大量胶原纤维沉积,与B组比较,C、D、E组注射BM-MSC后肺泡炎性和肺纤维化程度较轻。与A组比较,B组肺泡炎程度评分、肺纤维化程度评分、TGF-β1、HYP、MMP-2/TIMP-1水平增高(均P<0.05),MSC治疗后的C、D、E 3组可使上述指标下降(均P<0.05)。肺组织TGF-β1与肺泡炎程度评分、肺纤维化程度评分相关系数r=0.82、0.89,HYP与肺泡炎程度评分、肺纤维化程度评分相关系数r=0.86、0.92,MMP-2/TIMP-1与肺泡炎程度评分、肺纤维化程度评分相关系数r=0.83、0.92,均存在正相关(均P<0.05)。
结论BM-MSC可减低博来霉素致肺纤维化损伤,较高剂量和分次移植效果较好,其机制与移植细胞长期存活无关,可能与下调TGF-β1水平、改善MMP/TIMP失衡有关。