【摘 要】
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通过真核表达系统表达CD47胞外区融合蛋白,并免疫新西兰兔,制备多克隆抗体.构建CD47胞外区真核表达质粒pCHO1.0-CD47-mFc,转染CHO-S细胞,建立高效表达CD47胞外区融合蛋白的稳
【机 构】
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山东新时代药业有限公司,山东临沂273400;哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室,山东临沂273400;鲁南制药集团,山东临沂,276000;
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通过真核表达系统表达CD47胞外区融合蛋白,并免疫新西兰兔,制备多克隆抗体.构建CD47胞外区真核表达质粒pCHO1.0-CD47-mFc,转染CHO-S细胞,建立高效表达CD47胞外区融合蛋白的稳转细胞库,并表达CD47胞外区融合蛋白,通过protein G亲和色谱法纯化,SDS-PAGE和West Blot方法进行鉴定,Fortebio测定蛋白浓度.结果 显示,获得的CHO-S-CD47-mFc细胞库的表达量在322 mg/L,纯化后蛋白纯度大于92％,表达的CD47-mFc融合蛋白可同CD47抗体特异性结合;将此CD47-mFc蛋白免疫新西兰兔,多克隆抗血清的效价达到1∶102 400.
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