羊软骨中Ⅱ型胶原蛋白的提取纯化与鉴定

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以羊软骨为试验材料,经脱脂、脱钙、除杂蛋白后,用盐酸胍去除蛋白多糖,经胃蛋白酶酶解、氯化钠盐析、透析后对其进行提取纯化和鉴定。试验表明,经过单因素试验确定最佳脱脂剂为氯仿:甲醇:水=1:2:0.8,其脱脂率为55.88%;最佳脱钙试剂为0.5mol/LEDTA,其脱钙率为29.16%。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)电泳结果表明:提取的胶原蛋白与Sigma公司的Ⅱ型标准品相一致,证明羊软骨中存在的蛋白主要是Ⅱ型胶原蛋白。紫外光谱分析结果显示:所提胶原的最大吸收峰为230nm。
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