【摘 要】
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目的 动态观察培养的大鼠海马神经元经无镁损伤后不同时间细胞外信号调节激酶磷酸化(p-ERK1/2)及其核转移,探讨体外培养海马神经元受致痫性损伤后ERK1/2信号通路的动态变化. 方法 选24 h内新生Wistar大鼠,取双侧海马神经元,用NB培养基加B-27培养9 d,换成无镁细胞外液模拟"癫痫微环境",使得神经元受到致痫性损伤.采用免疫荧光标记,在激光共聚焦显微镜下定位无镁损伤前后p-ERK1
【机 构】
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563003,遵义医学院附属医院神经内科,563003,遵义医学院附属医院神经内科,重庆医科大学附属第二医院神经内科,563003,遵义医学院附属医院神经内科,重庆医科大学附属第二医院神经内科,第三军
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目的 动态观察培养的大鼠海马神经元经无镁损伤后不同时间细胞外信号调节激酶磷酸化(p-ERK1/2)及其核转移,探讨体外培养海马神经元受致痫性损伤后ERK1/2信号通路的动态变化. 方法 选24 h内新生Wistar大鼠,取双侧海马神经元,用NB培养基加B-27培养9 d,换成无镁细胞外液模拟"癫痫微环境",使得神经元受到致痫性损伤.采用免疫荧光标记,在激光共聚焦显微镜下定位无镁损伤前后p-ERK1/2的表达部位;运用Western blot技术检测无镁损伤不同时间p-ERK1/2表达强度的变化. 结果 无镁损伤前,p-ERK1/2主要在神经元胞浆和轴浆内表达,胞核表达不明显,而在损伤之后,p-ERK1/2在神经元胞浆、轴浆以及胞核内都有表达,强度接近;在损伤后1 h,p-ERK1/2表达就增强,3 h达到高峰(p-ERK1:2.2 838±0.1 186;p-ERK2:4.1 273±0.0 927),与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05). 结论无镁细胞外液损伤可引起培养的神经元p-ERK1/2的大量表达,培养神经元致痫性损伤后ERK1/2信号通路的过度激活可能与其反复癫痫样放电有关。
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