【摘 要】
：
目的 观察敲低CD2相关蛋白(CD2AP)基因表达对足细胞增殖和分裂的影响.方法 采用RPMI 1640培养基,在33℃培养永生化小鼠足细胞系.以PKH-26红色荧光染料标记足细胞后,用Metafec
【机 构】
：
华中科技大学同济医学院附属协和医院肾内科,华中科技大学同济医院肝病研究所
论文部分内容阅读
目的 观察敲低CD2相关蛋白(CD2AP)基因表达对足细胞增殖和分裂的影响.方法 采用RPMI 1640培养基,在33℃培养永生化小鼠足细胞系.以PKH-26红色荧光染料标记足细胞后,用Metafectene转染试剂转染针对CD2AP的小分子干扰RNA(siRNA).转染24 h后以流式细胞仪检测转染效率;48 h后用RT-PCR和Western印迹检测转染后CD2APmRNA和蛋白表达情况;72 h后以流式细胞仪检测足细胞增殖指数及细胞周期;用Oregon Green(R) 488标记的Paclitaxel直接标记足细胞内的微管蛋白;用激光共聚焦显微镜检测双核及多核足细胞的比例.结果 流式细胞仪结果显示,CD2AP特异性siRNA转染效率为66.27%.转染siRNA 48 h后,CD2AP mRNA和蛋白表达分别下降57%和39%.转染72 h后,足细胞增殖指数显著下降(P＜0.05),G2/M期的细胞数量显著增多(P＜0.05).共聚焦显微镜下可见转染CD2AP siRNA后,部分细胞有丝分裂后不能分离,双核及多核足细胞的比例显著增加(P＜0.05).结论 敲低CD2AP基因的表达能阻碍细胞有丝分裂后期的细胞分离,抑制足细胞的增殖能力.
其他文献
目的 探讨体外膜肺氧合(ECMO)在急危重症患者中治疗作用及应用价值.方法 自2002年1月至2006年3月行ECMO治疗严重循环呼吸功能衰竭患者55例,其中采用股动脉股静脉/颈内静脉插
目的探讨宫颈痛患者在广泛性子宫切除手术前后下泌尿道的尿动力学特点。方法选择Ⅰb～Ⅱa期宫颈癌患者46例,分别于广泛性子宫切除术前及术后进行尿动力学检查。结果26例(57%)患
眼底自发荧光技术是一种新近发展的非侵入性检查方法,利用它可以发现视网膜色素上皮层的某些改变,因此在视网膜疾病中有广泛的用途.本文介绍了眼底自发荧光技术在视网膜疾病
目的 比较特发性胸椎侧凸胸腔镜和小切口前路矫形椎体钉置入的精确性及其意义.方法 胸腔镜下胸椎侧凸前路矫形术共10例(A组),平均年龄14.4岁,平均Cobb角52.9°;小切口胸椎侧
目的:探讨改良的大隐静脉高位结扎和剥脱术的治疗效果.方法:收集2003-05～2004-05 收治的单纯性下肢大隐静脉曲张病人36例,采用改良的大隐静脉高位结扎和剥脱术进行手术治疗.结
目前我国的中药制剂尚未进入世界医药主流市场,难以参与国际竞争,其关键原因在于长期以来缺乏被国际认可和接受的严格的客观标准和规范[1].国际植物药市场中已经出现标准植物
目的:从抗幽门螺杆菌(H pylori)全菌蛋白的单克隆抗体(mAb)中,应用重组中性粒细胞激活蛋白(NAP),筛选出抗NAP单抗并进行鉴定.方法:临床分离H pylori DY01,DY04株.免疫BALB/c
目的探讨经阴道子宫骶骨韧带高位悬吊术(HUS)治疗子宫脱垂的解剖生理基础、适应证、手术技巧、输尿管损伤的预防及临床近、中期疗效。方法 2003年6月至2007年9月,采用经阴道
目的: 探讨经皮肝穿刺治疗细菌性肝脓肿的方法及疗效.方法: 对采用超声普通探头引导吸取脓液后注射抗菌素药物治疗肝脓肿27例治疗效果进行总结与分析.结果: 27例全部治愈,未