内生真菌对大花红景天中红景天苷合成代谢途径中关键酶基因表达的影响

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以活性内生真菌ZPRa-R-1促进大花红景天积累红景天苷为基础,筛选红景天苷合成代谢途径中管家基因的稳定性,建立以双内参基因评价红景天苷合成代谢中关键酶基因表达规律的方法。通过实时荧光定量PCR,以及ge Norm、Norm Finder、Best Keeper等软件分析管家基因的稳定性,利用2-ΔΔCt的方法分析关键酶基因的相对表达量。结果表明,真菌ZPRa-R-1与大花红景天互作条件下,甘油醛磷酸脱氢酶(GAPDH)基因的表达最稳定,其次是PCS;最精确的校准误差方法为双内参基因组合;真菌ZPRa-R-1对红景天苷合成代谢关键酶基因及其表达产物产生规律性影响:互作8天时,尿苷-磷酸葡萄糖转移酶(UDPGT)基因的相对表达量达到对照组的17.1倍;互作10天时,PAL相对表达活性达到峰值,为对照组的4.9倍;互作12天时,Ty DC基因相对表达量达到最大,为对照组的2.8倍;而对TAT表达量影响较小。同时,关键酶基因表达的变化与终产物红景天苷呈正相关关系。
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