【摘 要】
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目的 探讨甲基磺酸敏感蛋白2(MMS2)在血管紧张素Ⅱ(AⅡ)诱导神经干细胞(NSCs)向多巴胺(DA)能神经元定向分化过程中的作用.方法 体外分离培养新生鼠大脑来源的NSCs.通过巢蛋白
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目的 探讨甲基磺酸敏感蛋白2(MMS2)在血管紧张素Ⅱ(AⅡ)诱导神经干细胞(NSCs)向多巴胺(DA)能神经元定向分化过程中的作用.方法 体外分离培养新生鼠大脑来源的NSCs.通过巢蛋白免疫细胞化学方法对神经前体细胞进行鉴定;在此基础上,将第2代的NSCs按实验设计分成6组:A:对照组;B:AⅡ组;C:AT1受体拮抗剂ZD7155组;D:AT1受体拮抗剂ZD7155+AⅡ组;E:AT2受体拮抗剂PD123319组;F:AT2受体拮抗剂PDl23319+AⅡ组.通过实时荧光定量PCR检测各组细胞MMS2及TH mRNA的表达;转染MMS2基因的小干扰RNA(siRNA)片段到NSCs上沉默MMS2在NSCs的表达,再按以上分组将其诱导分化为DA能神经元,通过实时荧光定量PCR方法检测转染后诱导分化的各组细胞TH mRNA的表达.结果 体外分离培养的NSCs,在培养基中呈悬浮生长,神经球表达Nestin.实时荧光定量PCR法检测B组、D组细胞的MMS2及TH mRNA的表达高于对照组,其差异有统计学意义(P0.05),转染MMS2-siRNA后诱导分化的各组细胞间TH mRNA的表达无统计学意义(P>0.05 o结论AⅡ通过AT2受体使MMS2在NSCs的表达升高并诱导NSCs向DA能神经元分化,MMS2在AⅡ诱导NSCs向DA能神经元定向分化的过程中可能发挥重要作用.
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