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本工作改良了小鼠肝细胞的分离技术,并建立了小鼠肝细胞的无血清培养方法。采用二步原位灌流法分离的小鼠肝细胞,其活率及产量分别为86.9±1.0%和2.3±0.3×107,能够满足实验的要求。肝细胞在无血清培养条件下,24小时可完全贴壁,在继续培养的24~48小时期间,漏入培养液中的GPT和GOT可稳定于低水平,贴壁细胞数量(以贴壁细胞DNA含量为指标)与培养前的活细胞数基本相同并保持稳定,肝细胞形态正常,糖原合成良好,表明在无血清培养24~48小时期间,肝细胞的存活状态和功能状态都保持良好,为进行实验研究的最佳时机。