虾过敏DNA疫苗的设计和构建

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通过“一珠一化合物”方法筛选虾过敏的抗原表位,加上免疫元件构建重组真核表达质粒。取对虾过敏患者的血清,纯化抗体。用所得抗体从耦联氨基酸多肽库中筛选出不同长度的多肽20个。在每个多肽前后加入免疫元件(KOZAK序列、Th-PADRE、CpG1、Th-P18mn、CpG2、tPA前导序列、多肽加尾信号),根据密码子表和JCAT网站选出适宜在小鼠内表达的DNA序列。按重叠PCR的方法设计6个20bp的核苷酸链,通过PCR获得全长片段,双酶切连接入真核表达载体,构建重组表达质粒。经测序分析,证明成功构建虾抗原表位
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