论文部分内容阅读
摘要：为了构建GLRX3（Glutaredoxin 3）敲除的HEK293细胞系，根据该蛋白结构特性设计了靶向于GLRX3基因Exon5的4个sgRNA，并通过T7E1检测确认了所设计sgRNA的有效性。将携带Cas9及靶向hGLRx3-Exon 5的sgRNA1的打靶载体转染HEK293，通过药物Puromycin和细胞克隆化筛选出稳定GLRX3基因敲除的HEK293细胞株，并通过测序确定GLRX3两个等位基因均发生移码突变。通过免疫印迹在蛋白表达水平确认了该基因的敲除。利用CRISPR／Cas9技术成