人心肌营养素在大肠杆菌中的表达纯化和活性鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：haiyutong

【摘要】

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目的利用大肠杆菌高效表达可溶性具有生物学活性的重组huCT-1蛋白.方法采用PCR及T-A克隆将huCT-1开放阅读框基因克隆到pMD-18T载体上,再构建原核表达载体pGEX2T-huCT1.在不同

【作者】

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张正丰廖维宏杨青峰

【机构】

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第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第三研究室

【出处】

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第三军医大学学报

【发表日期】

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2003年24期

【关键词】

：

心肌营养素-1 原核重组蛋白生物活性神经元 cardiotrophin1 prokaryotic recombinant protein biologica

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目的利用大肠杆菌高效表达可溶性具有生物学活性的重组huCT-1蛋白.方法采用PCR及T-A克隆将huCT-1开放阅读框基因克隆到pMD-18T载体上,再构建原核表达载体pGEX2T-huCT1.在不同温度不同时间,通过IPTG诱导pGEX2T-huCT1在DH5a大肠杆菌中表达,SDS-PAGE分析表达量和可溶性蛋白比例.GST亲和柱纯化huCT-1融合蛋白,凝血酶酶切融合蛋白并纯化.坐骨神经切断模型观察重组huCT-1对脊髓前角神经元的存活作用.结果构建了huCT-1的融合表达载体pGEX2T-huCT

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