人LAK细胞抗菌活性多肽HLP-3P21的分离纯化和鉴定

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:saosaoxp
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目的分离纯化人LAK细胞小分子抗菌多肽,鉴定其分子特性,检测其抗菌活性. 方法采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,并用IL-2和PHA刺激培养.5%乙酸匀浆细胞获得其酸溶性提取物.应用制备酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和反相高效液相色谱技术分离纯化多肽,Tricine-SDS-PAGE鉴定其相对分子质量(Mr),运用琼脂糖弥散法鉴定其抗菌活性,采用Edman降解法测定其氮端序列,并进行肽质谱分析. 结果从人LAK细胞酸溶性提取物中纯化出一多肽,Tricine-SDS-PAGE表观Mr为17×103,命名为HLP-3P21(human lymphocyte peptide),具有抗致病性大肠杆菌ML-35P及铜绿假单胞菌ATCC65922的活性.其氮端序列为PKRKAEGDAK,肽质谱的检索分析未发现匹配度大于50%的蛋白质分子. 结论 HLP-3P21可能为LAK细胞一新的抗菌效应分子.

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