NNMT基因重组表达质粒的构建以及在大肠杆菌中的表达

来源 :浙江医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：neu20063043

【摘要】

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目的利用p GEX—4T-2表达系统表达制备尼克酰胺N-甲基转移酶（NNMT）抗原。方法根据NCBI核苷酸数据库编码为gi：12652950人NNMT cDNA序列，设计合成编码NNMT的DNA引物，并分别在5’端和

【作者】

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马春芳张钧谢鑫友周美霞

【机构】

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杭州浙江大学医学院附属邵逸夫医院检验科

【出处】

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浙江医学

【发表日期】

：

2006年1期

【关键词】

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尼克酰胺N-甲基转移酶抗原融合蛋白表达 Nicotinamide N-methyhransferase Antigen Fusion protein exp

【基金项目】

：

浙江省医学卫生科学研究基金（2005A055）

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目的利用p GEX—4T-2表达系统表达制备尼克酰胺N-甲基转移酶（NNMT）抗原。方法根据NCBI核苷酸数据库编码为gi：12652950人NNMT cDNA序列，设计合成编码NNMT的DNA引物，并分别在5’端和3’端设计BamHI和XhoI位点，利用RT-PCR从人肝组织中克隆NNMT基因，经T—A克隆、亚克隆至p GEx-4T-2表达载体，重组质粒转化到大肠杆菌BL-21-STAR（DE3），经异丙基-β—D-硫代乳糖苷诱导表达，Glutathione Sepharose 4B亲和层析制备融合蛋白

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