【摘 要】
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目的构建人前脑啡肽(homo sapiens proenkephalin,PENK)基因过表达克隆载体,研究其功能意义。方法用HIV载体质粒与PENK基因连接,构建成功后用双酶切及测序验证PENK克隆重组体
【机 构】
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新疆医科大学附属肿瘤医院麻醉科,四川大学华西医院转化神经科学中心,
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目的构建人前脑啡肽(homo sapiens proenkephalin,PENK)基因过表达克隆载体,研究其功能意义。方法用HIV载体质粒与PENK基因连接,构建成功后用双酶切及测序验证PENK克隆重组体的成功构建。用293Ta包装慢病毒后转染HT1080以测定慢病毒滴度。用PENK-HIV慢病毒颗粒转染PC12细胞,同步设立对照组(未转染PENK),对两组细胞转染后48h采集图片并经行细胞计数,收集细胞,用RT-PCR检测各组中PENK mRNA表达变化。结果 PENK克隆载体酶切及测序结果都验证了克隆构建成功。PENK-HIV慢病毒成功转染PC12细胞48h后,对照组细胞数为88.60±2.55,而PENK转染组细胞数为127.93±2.48,差异有统计学意义(P<0.01)。结论用HIV载体质粒成功构建的PENK克隆重组体可能会促进PC12细胞的生长。
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