RNA干扰介导的人肺腺癌A549细胞FasL基因沉默及意义

来源 :中国实用医刊 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zxc00663340
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 构建针对肿瘤凋亡基因FasL的小干扰RNA(siRNA)表达质粒,研究RNA干扰技术对人肺腺癌A549细胞FasL mRNA表达的抑制作用,探索Fas/FasI途径在肺癌转移中的作用机制.方法 依据siRNA靶序列的设计原则,以FasL mRNA为靶基因,合成2对编码短发夹结构的两条DNA序列,经退火合成DNA双链,再克隆至siRNA表达质粒pSilencer2.0中,转化后进行PCR鉴定和DNA序列测定.用脂质体介导转染入人肺腺癌A549细胞株,采用实时荧光定量PCR检测细胞FasL mRNA水平的变化.结果 成功构建发卡样FasL siRNA真核表达载体,转染人肺腺癌A549细胞后,FasL mRNA的表达水平显著下降.结论 成功构建的FasL基因siRNA真核表达载体pSi2.0-FasL能显著抑制人肺腺癌A549细胞FasL mRNA的表达。

其他文献
目的研究入住CCU病房患者的药学监护点。方法专职临床药师随医师查房1年,做查房记录,对危重及特殊患者建住院药历和对患者做住院用药交代。结果总结出CCU患者药学监护点。结