【摘 要】
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目的 经胆道分支逆行导入非病毒载体基因复合物,观察目的基因在正常及急性损害大鼠局部肝脏的定量定位表达.方法 运用D-氨基半乳糖制作大鼠急性肝损害模型;非病毒载体基因复
【机 构】
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解放军第三○二医院肝衰竭治疗研究中心
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目的 经胆道分支逆行导入非病毒载体基因复合物,观察目的基因在正常及急性损害大鼠局部肝脏的定量定位表达.方法 运用D-氨基半乳糖制作大鼠急性肝损害模型;非病毒载体基因复合物polylysine-molossin/DNA/fusogenic经胆管分支分别将包含萤火虫荧光素基因质粒pGL3及包含大肠埃希氏菌β半乳糖苷酶基因质粒CMVβ逆行导入大鼠局部肝脏,定量检测荧光素酶和定位检测β半乳糖苷酶在肝脏的表达.结果 荧光素酶基因在正常大鼠肝脏极少表达,在急性肝脏损害恢复期(造模后第4～7天)表达水平显著增加(P＜0.05),在造模后第9天表达水平与正常组无显著差别.大肠埃希氏菌β半乳糖苷酶定位检测见急性肝损害大鼠肝脏内显著表达,正常大鼠肝脏几乎无表达,其中可见较多肝细胞表达.基因导入可引起血清ALT、AST水平升高,血清白蛋白水平略下降,但基因表达与肝功能酶生化指标水平及变化无明显相关.组织学改变不显著.结论 非病毒载体基因复合物导入急性损害肝脏局部能获得较好表达,且无明显加重肝脏损害,该项方法为肝脏基因治疗的实验研究提供了良好的技术平台.
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