【摘 要】
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花青素赋予植物丰富的颜色。花青素合成酶是花青素合成途径末端的一个重要催化酶。为了研究蓝星睡莲花色形成过程中的关键酶基因NcANS的序列特征、表达规律和启动子结合元件，本研究分别以蓝星睡莲叶片和花瓣为材料，采用PCR和RT-PCR方法分别克隆了NcANS的基因序列和编码区序列，基因序列长度为1 277 bp，两个外显子中间有一个200 bp内含子；编码区序列含完整的开放读码框（ORF），为 1 0
【基金项目】
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中央高校基本业务费（SWU118099）； 西南大学“大学生创新创业训练计划”市级重点领域支持项目（S202110635232）； 国家自然科学基金青年科学基金项目（31700625）；
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花青素赋予植物丰富的颜色。花青素合成酶是花青素合成途径末端的一个重要催化酶。为了研究蓝星睡莲花色形成过程中的关键酶基因NcANS的序列特征、表达规律和启动子结合元件，本研究分别以蓝星睡莲叶片和花瓣为材料，采用PCR和RT-PCR方法分别克隆了NcANS的基因序列和编码区序列，基因序列长度为1 277 bp，两个外显子中间有一个200 bp内含子；编码区序列含完整的开放读码框（ORF），为 1 077 bp，编码358个氨基酸，含有DIOX-N和2-酮戊二酸-Fe2+-双加氧酶保守域，后者含有2-酮戊二酸和Fe2+的活性位点。氨基酸序列比对和系统发育分析表明，NcANS与基部被子植物无油樟ANS一致性最高，与同属侏儒卢旺达睡莲亲缘关系最近，与单子叶植物进化关系最远。荧光定量PCR结果表明NcANS的表达量在蓝星睡莲花药中最高，其次是在花瓣S3时期，在花瓣的五个发育时期呈先升高后急剧降低的趋势，在S3时期达到峰值。直接PCR技术分离得到的NcANS启动子序列长度为1 382 bp，其含有MYB、MYC等转录因子结合位点、参与响应厌氧、低温、光、茉莉酸甲酯、生长素、发育或代谢等信号的顺式作用元件。本研究结果为进一步研究NcANS基因功能和蓝星睡莲花色形成分子机理奠定基础。
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