【摘 要】
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目的：：采用Overlapping PCR（重叠PCR）法进行人源SK2通道Flag和GFP融合表达质粒的构建，为下一步胞外运用Flag抗体进行SK2通道的转运调控研究奠定基础。方法：在既往克隆的人SK2通道基
【机 构】
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西南医科大学心血管医学研究所 医学电生理学教育部重点实验室 四川省心血管疾病防治协同创新中心,四川泸州,646000
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目的：：采用Overlapping PCR（重叠PCR）法进行人源SK2通道Flag和GFP融合表达质粒的构建，为下一步胞外运用Flag抗体进行SK2通道的转运调控研究奠定基础。方法：在既往克隆的人SK2通道基因的表达质粒pIRES-SK2的基础上，采用重叠PCR法构建Flag和GFP双标签标记的表达质粒pEGFP-N3-Flag-SK2（简写为Flag-SK2-GFP）。结果：构建的表达质粒Flag标签插入SK2通道的S1-S2胞外环区域，GFP标签连接SK2通道胞内的C末端，通过酶切、测序等证实质粒构建成功。结论：成功构建人心房肌SK2通道基因表达质粒Flag-SK2-GFP，为下一步研究SK2通道转运过程及调控机制奠定了基础。
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