【摘 要】
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目的探讨生长分化因子11(GDF11)对小鼠神经干细胞增殖及转化生长因子-β(TGF-β)/Smads、Wnt/β-连环蛋白信号通路关键蛋白表达的影响。方法分离培养及诱导分化孕14 d CD1胎鼠大脑侧脑室下区的神经干细胞，采用免疫荧光染色鉴定神经干细胞特异性蛋白巢蛋白、SOX2，以及在诱导分化后鉴定神经元标志物神经核抗原(NeuN)和星型胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。取第3代神经干
【机 构】
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230032 合肥，安徽医科大学230032 合肥，安徽医科大学,230032 合肥，安徽医科大学；100700 北京，陆军总医院临床学院附属八一脑科医院,100700 北京，陆军总医院临床学院附属八
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目的探讨生长分化因子11(GDF11)对小鼠神经干细胞增殖及转化生长因子-β(TGF-β)/Smads、Wnt/β-连环蛋白信号通路关键蛋白表达的影响。
方法分离培养及诱导分化孕14 d CD1胎鼠大脑侧脑室下区的神经干细胞，采用免疫荧光染色鉴定神经干细胞特异性蛋白巢蛋白、SOX2，以及在诱导分化后鉴定神经元标志物神经核抗原(NeuN)和星型胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。取第3代神经干细胞分为实验组和对照组，实验组添加GDF11(终浓度40 ng/mL)，对照组添加等体积完全培养液。采用EdU法检测2组细胞增殖情况，采用Western blotting于培养1 h、6 h时检测2组细胞Smad2/3、磷酸化(p)-Smad2/3、Smad4、β-连环蛋白表达。
结果免疫荧光染色显示90%以上细胞呈巢蛋白和SOX2阳性，诱导分化后部分细胞呈NeuN或GFAP阳性。细胞增殖实验显示：与对照组EdU阳性细胞比例(0.24±0.03)相比，实验组EdU阳性细胞比例(0.34±0.08)明显提高，差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果显示：实验组p-Smad2/3、Smad4和β-连环蛋白表达在培养1 h、6 h时均明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论GDF11可在体外促进小鼠神经干细胞增殖，其机制可能与TGF-β/Smad、Wnt/β-连环蛋白信号通路激活有关。
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