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目的:研究兔关节软骨细胞的寸离、培养方法,观察不同年龄兔软骨细胞的形态学特性。方法:无菌条件下,从不同年龄新西兰白兔的四肢关节髁突面削取软骨片,采用机械-酶消化法分离软骨细胞,经台盼蓝拒染计数,传代培养。应用甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组化对细胞进行鉴定,利用相差显微镜及透射电镜观察细胞形态,激光共聚焦扫描显微镜检测软骨细胞直径。结果:培养2d~3d,细胞贴壁、变形,呈多角形;8d左右,细胞融合成层。甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色阳性。透射电镜观察显示,随兔年龄改变,关节软骨细胞的超微结构也有所差异。用激光扫描共聚焦显