利用Red同源重组系统构建兔次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因打靶载体

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shijiancuowu

【摘要】

：

利用EL350基因工程菌进行同源重组，成功进行基因敲除已有报道，但利用该系统进行兔次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase，HPRT）基因突

【作者】

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张传山李峰姚刚郭毅鲍柳君陈学进

【机构】

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新疆农业大学动物医学学院,上海交通大学医学院实验动物科学部,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,苏州大学生命科学学院

【出处】

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中国生物工程杂志

【发表日期】

：

2008年9期

【关键词】

：

RED重组次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因基因敲除载体 Red recombination HPRT gene Knockout Vector

【基金项目】

：

上海市科技兴农重点攻关项目（沪农科攻字（2005）第3～5号）、上海市科技兴农重点攻关项目（沪农科攻字（2006）第5～3号）资助项目

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利用EL350基因工程菌进行同源重组，成功进行基因敲除已有报道，但利用该系统进行兔次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase，HPRT）基因突变和基因打靶方面的研究还没有报道。实验首先在已经筛选到含有兔全长HPRT基因BAC克隆（LBNL1-304M19）的基础上，利用Red重组系统，通过Gap—Repair方式从此克隆上将一段47kb无启动子的HPRT基因组片段（不合有第1个外显子）克隆到pBACLinkSp质粒上，产生

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