【摘 要】
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目的：构建用于靶向基因治疗的重组真核表达质粒pHsp70-hsv-tk（pHT）,体外转染SMMC-7721肝癌细胞,观察热诱导基因表达情况。方法：设计1对引物,以pHSV-106质粒为模板进行PCR扩增,将
【机 构】
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东南大学基础医学院,无锡市妇幼保健院中心实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（批准号：30500601）,国家863计划资助项目（批准号：2007AA032356）,无锡市医院管理中心重大技术项目资助（批准号：ZD0604）
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目的：构建用于靶向基因治疗的重组真核表达质粒pHsp70-hsv-tk（pHT）,体外转染SMMC-7721肝癌细胞,观察热诱导基因表达情况。方法：设计1对引物,以pHSV-106质粒为模板进行PCR扩增,将扩增产物纯化所得目的基因片段与pD3SX载体连接,转化大肠杆菌E.coliDH5α,克隆PCR法筛选菌落,测序鉴定后大量抽提质粒。磁性转染法将pHT导入SMMC-7721,加热处理后,用RT-PCR法检测tk基因的整合。结果：获得重组的hsv-tk基因条带。结论：成功构建了pHT质粒,可用于进行靶向性
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