斑马鱼卵黄原蛋白的纯化鉴定及其2种ELISA的开发

来源 :中国海洋大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vpnyoyo
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斑马鱼卵黄原蛋白(Vitellogenin,VTG)是检测环境雌激素活性的重要生物标志物。为了确定最佳的斑马鱼VTG检测方法,本研究利用纯化的斑马鱼VTG及其多克隆抗体同时建立了竞争ELISA与夹心ELISA,并比较了2种方法对VTG的敏感度与精确度。采用凝胶过滤与离子交换层析相结合的方法从17伊雌二醇暴露后的斑马鱼整体匀浆液中纯化获得了2种高分子量的糖磷脂蛋白,SDS变性电泳显示分子量为180与143kDa的两条主带,证实纯化的蛋白为斑马鱼VTG。Westernblot结果表明制备的抗血清对斑马鱼VTG
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