【摘 要】
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目的：构建hClock-（35-47）_Bax-（55-77）的表达质粒,进行诱导表达,纯化和鉴定。方法：合成hClock-（35-47）_Bax-（55-77）全长DNA序列,重组入pET-32a表达载体中,测序鉴定后转化入大肠杆菌Rose
【机 构】
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四川大学基础医学与法医学院生物医学工程研究室
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目的：构建hClock-（35-47）_Bax-（55-77）的表达质粒,进行诱导表达,纯化和鉴定。方法：合成hClock-（35-47）_Bax-（55-77）全长DNA序列,重组入pET-32a表达载体中,测序鉴定后转化入大肠杆菌Rosetta（DE3）菌株,构建好重组体的表达菌株。IPTG诱导并优化表达后,以NTA-Ni亲合层析进行分离纯化,及SDS-PAGE和Western blotting鉴定。结果：成功构建了hClock-（35-47）_Bax-（55-77）的表达载体,插入片断为128bp,
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用5口面积均为2亩的池塘进行德克萨斯选育品系斑点叉尾鮰夏花至鱼种的培育，放养密度每亩6000尾，饲养111～114d，斑点叉尾鮰平均尾重从0．08g长至43．55g，饲料系数1．31，成活率85．1％，平均亩净收