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天麻-钩藤药对是临床治疗帕金森病出现频次最高的药对,天麻素和异钩藤碱是天麻-钩藤药对抗帕金森病的主要有效成分.为了观察天麻素联合异钩藤碱对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)诱导的PC12细胞凋亡的影响及探讨其抗氧化机制,该研究采用分光光度法检测细胞上清液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量,流式细胞术检测细胞凋亡,碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染法检测细胞周期分布,分光光度法检测脂质过氧化物(lipid peroxidation,LPO)含量,实时定量PCR法检测细胞easpase-3 mRNA表达,免疫印迹法检测血红素加氧酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)和醌氧化还原酶-1 (NADPH:quinone oxidore-ductase 1,NQO-1)蛋白表达.结果 发现,天麻素联合异钩藤碱显著降低Mpp+诱导的PC12细胞FITC-Annexin V阳性细胞比率和细胞周期阻滞,显著下调Mpp+诱导的PC12细胞caspase-3 mRNA表达,显著降低MPP+诱导的PC12细胞LPO含量,上调HO-1和NQO-1蛋白表达.值得注意的是,天麻素联合异钩藤碱的这些药理作用可被细胞外信号调节激酶1/2 (extracellular signal-regulated kinases 1/2,ERKl/2)抑制剂PD98059、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)抑制剂LY294002或/和糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)抑制剂氯化锂预处理逆转,提示天麻素联合异钩藤碱通过ERK1/2和PI3K/GSK-3β信号通路抑制MPP+诱导的PC12细胞凋亡和氧化应激.结果 表明,天麻素联合异钩藤碱上调MPP+诱导的PC12细胞HO-1和NQO-1蛋白表达,进而减少氧化应激,抑制其凋亡.