【摘 要】
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目的 制备靶向血栓纤维蛋白诊疗一体化的多功能明胶纳米粒，在体外探究其双模态显像潜能与光热增效药物溶栓作用，并在体内观察其对血栓的主动靶向能力。方法 采用二次去溶剂法及碳二亚胺法制备靶向纤维蛋白多肽（Cys-Arg-Glu-Lys-Ala，CREKA）介导的载阿替普酶（rt-PA）及四氧化三铁（Fe3O4）的磁性明胶纳米粒（CREKA-Fe-rt-PA-Gel）。观察该纳米粒形态，检测其理化性质及体
【基金项目】
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国家自然科学基金（81971608）～～；
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目的 制备靶向血栓纤维蛋白诊疗一体化的多功能明胶纳米粒，在体外探究其双模态显像潜能与光热增效药物溶栓作用，并在体内观察其对血栓的主动靶向能力。方法 采用二次去溶剂法及碳二亚胺法制备靶向纤维蛋白多肽（Cys-Arg-Glu-Lys-Ala，CREKA）介导的载阿替普酶（rt-PA）及四氧化三铁（Fe3O4）的磁性明胶纳米粒（CREKA-Fe-rt-PA-Gel）。观察该纳米粒形态，检测其理化性质及体外安全性；验证其体外光声（PA）及磁共振（MR）显像特征；检测其光热效能；采用纤维蛋白及血红蛋白指标评估光热增效药物的溶栓效果及破坏纤维蛋白网状结构的能力；构建颈动脉血栓动物模型，观察该纳米粒的体内血栓靶向能力。结果 所制备的磁性明胶纳米粒CREKA-Fe-rt-PA-Gel大小均一，粒径（254.79±6.83） nm，多分散系数（0.09±0.05），表面电位（5.48±4.60） mV；成功连接CREKA且连靶率为98.66%，rt-PA包封率为23.03%±0.05%，Fe3O4包封率为92.78%±0.57%，磁滞曲线显示其具有良好的顺磁性。体外细胞毒性试验及溶血试验显示该纳米粒具有良好的生物相容性。在体外PA及MR成像中该纳米粒表现出优异的成像能力。经激光辐照后纳米溶液呈浓度依赖性快速升温；与血栓孵育后经近红外辐照，溶液中血红蛋白及纤维蛋白指标均明显升高（P＜0.01），且纳米粒释放药物联合光热能够显著损毁纤维蛋白网状结构；大鼠颈动脉血栓HE染色显示该纳米粒有良好的体内血栓靶向能力。结论 构建的CREKA-Fe-rt-PA-Gel纳米粒具备双模态（PA/MR）显像潜能、良好的光热效力、优异的血栓（纤维蛋白）靶向能力，且联合光热有较强的溶栓作用，有望用于临床血栓性疾病的早期诊断与多形式治疗。
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