【摘 要】
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甲基对硫磷水解酶(MPH)是一种新的有机磷水解酶.将完整的甲基对硫磷水解酶基因(mpd)构建入pUC19载体,使得mpd基因以自身的启动子在Escherichia coli DH5α中表达并得到了纯化
【机 构】
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南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室
【基金项目】
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中国科学院资助项目，国家科技攻关项目
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甲基对硫磷水解酶(MPH)是一种新的有机磷水解酶.将完整的甲基对硫磷水解酶基因(mpd)构建入pUC19载体,使得mpd基因以自身的启动子在Escherichia coli DH5α中表达并得到了纯化.金属螯合实验发现MPH的活性不受金属螯合剂1,10-菲啰啉的影响;但用电感耦合等离子发射光谱测定其金属含量显示MPH是金属酶,1mol酶中结合了2mol的Zn2+.为确定参与MPH催化活性的必需氨基酸,用化学修饰剂碳化二亚胺、二乙基焦磷酸酯、磷酸吡哆醛和丁二酮处理MPH,然后检测其残余酶活力,结果表明天冬氨
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