【摘 要】
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目的 分析微小RNA(miR)-373在肝门部胆管癌的表达与临床病理因子之间的关系,探讨miR-373靶向甲基CpG结合蛋白2(MBD2)-3’端非翻译区(3 UTR)的机制.方法 TaqMan miRNA Assay检
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科,武汉,430030;
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目的 分析微小RNA(miR)-373在肝门部胆管癌的表达与临床病理因子之间的关系,探讨miR-373靶向甲基CpG结合蛋白2(MBD2)-3’端非翻译区(3 UTR)的机制.方法 TaqMan miRNA Assay检测miR-373的表达,采用QuantiTect_Primer Assays和West blot法分析甲基CpG结合蛋白(MBPs) mRNA和蛋白水平；双荧光素酶报告基因检测miR-373对MBD2-3 UTR的靶向作用.结果 miR-373在肝门部胆管癌中卜调2.94倍(P＜0.01).与高表达组比较,miR-373低表达与肿瘤细胞低分化(P＜0.05)、高分期(P＜0.05)、短总生存和无病生存时间(P＜0.05)相关.miR-373低表达肿瘤组织中,MBD2的mRNA和蛋白表达分别上调3.75倍(P＜0.01)、2.34倍(P＜0.05)；miR-373前体抑制MBD2-3 UTR荧光素酶活性1.79倍；外源性miR-373和anti-miR-373分别下调QBC939细胞、上调人肝内胆管上皮细胞(HIBEpic)中MBD2表达2.56倍(P＜0.01)和2.13倍(P＜0.01).结论 miR-373通过结合在MBD2-3 UTR,抑制MBD2表达.肝门部胆管癌中,miR-373下调导致MBD2表达增高,与肿瘤进展和预后密切相关.
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